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      黄色秋葵视频bio-rad轉印槽使用方法步驟

      更新時間:2017-10-11  |  點擊率:2651
        黄色秋葵视频bio-rad轉印槽可快速、高質量地轉印小型凝膠。作為Mini-PROTEAN 3 電泳係統的一個組件,黄色秋葵视频bio-rad轉印槽能容納2 個凝膠支架轉印夾,用於在Mini-PROTEAN 3 電泳槽內電轉印兩種小凝膠(Mini-PROTEAN 3 凝膠和ReadyGel 預製膠)。
        黄色秋葵视频bio-rad轉印槽特點包括:
        1.1小時內轉印2 塊7.5 x 10 cm 凝膠;也可進行低強 度的過夜轉印
        2.電極絲相距4cm,以產生強電場保證有效的蛋白轉印
        3.顏色標記的轉印夾和電極,確保轉印過程中凝膠 的正確定向
        4.內置bio-rad冷卻裝置,快速吸收轉移過程中產生 的熱量
        5.既可作為完整的獨立設備,又可作為一個模塊與 Mini-PROTEAN 3 轉印槽的緩衝液槽和蓋兼容
        黄色秋葵视频bio-rad轉印槽使用方法步驟:
        全程請戴手套操作,以免汙染黄色秋葵视频bio-rad轉印槽!
        1)電泳後SDS-PAGE 膠片浸在轉印緩衝液中,洗2~3 次,每次10min.
        2)取出黄色秋葵视频bio-rad轉印槽,先小心放一攪拌子在底部,再倒一半轉印緩衝液。
        3)取轉印紙切成約如膠片大小,先在方形培養皿中以少許甲醇浸濕數秒鍾,再置入黄色秋葵视频bio-rad轉印槽中的緩衝液10 min 後使用。 另取兩張濾紙,以及兩片方形海綿墊,都放在黄色秋葵视频轉印槽的緩衝液中備用。
        4)取出轉印夾打開平放,先墊一張方形海棉墊,鋪上一張濕濾紙,小心平鋪SDS-PAGE膠上去,然後小心迭上已潤濕的轉印紙,用塗菌玻璃棒趕出氣泡;轉印紙再滴上數滴緩衝液後,加蓋一層濾紙,及另一張海綿,也都不可陷入氣泡,即可把整個轉印三明治卡夾裝好。
        膠迭到轉印紙時,一次成功,不要重作,否則蛋白質色帶可能會印上去,zui後產生重迭影像。
        5)將轉印三明治置入已經放有一半轉印緩衝液的黄色秋葵视频bio-rad轉印槽中,注意有轉印紙的那一麵向正極(紅色),膠片那麵向負極(黑色)。
        6)當三明治都放入黄色秋葵视频bio-rad轉印槽後,以轉印緩衝液蓋滿所有的三明治,小心動一動卡夾,除去附在卡夾內外的氣泡,蓋上蓋子,放到一攪拌器上,打開攪拌器開始攪拌,同時接好電源,裝置完成後放置10 min.
        7)以300mA開始轉印,溫度會漸漸上升,轉印1.5 h左右 後中止轉印,取出轉印三明治,打開後依次取出轉印紙及膠。
        具體轉印條件要根據蛋白的大小進行優化,注意低溫。
        8)轉印後的膠片可以繼續進行染色,看有無蛋白質殘留。若電泳時加有藍色標準蛋白質marker(SeeBlue),則可在轉印紙上看到藍色的色帶,確定轉印成功,並可評估轉印效率。
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